Медицинская микробиология, иммунология и вирусология - Сергей Бабичев

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются гной, мокрота, кровь, ликвор, кусочки ткани из органов, в которых при микроскопии обнаруживают характерные сферулы, легче различимые в неокрашенных препаратах. Всегда четкие, достоверные результаты дает получение чистой культуры при посеве на среды Сабуро, МПА и МПБ с глюкозой. Посевы инкубируют при 27 и 37 °C от 3 нед. до 2 мес. Работа с культурами требует соблюдения особо строгого режима во избежание ингаляторного заражения. Чистая культура хорошо выделяется при заражении белых мышей или самцов морской свинки при развитии у животного прогрессирующих очагов поражения. Серологическая диагностика осуществляется посредством реакции агглютинации, преципитации, РСК, так как через 2 – 4 нед. после заражения появляются антитела классов IgM и IgG. При диссеминации процесса нарастание титра комплементсвязывающих антител является плохим прогностическим признаком. Аллергические кожные пробы ставят с кокцидиоидным аллергеном в разведении 1: 1000, при отрицательном результате – 1: 100. Результат учитывают через 48 ч. При положительной пробе отмечаются гиперемия, припухлость, папула в месте введения. При диссеминированной форме кожные пробы иногда бывают отрицательными.

Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая профилактика кокцидиоидоза сводится к борьбе с запыленностью; проводятся асфальтирование дорог; увлажнение почвы при земляных работах; мелиоративные мероприятия; покрытие почвы, инфицированной грибом, густым растительным газоном; применение противопылевых масок и т. д.

Для лечения кокцидиоидоза, а также микозов, вызванных грибами Candida, Cryptococcus, Microsporum, Trichophyton, Blastomyces, Coccidioides immitis, Histoplasma capsularum предложен препарат широкого спектра действия флюкостат, производное триазола. Он подавляет синтез эргостерола, в результате чего нарушается проницаемость клеточной стенки грибов. Рекомендуются также амфотерицин В или его производные.

Бластомикозы

Бластомикозы – группа глубоких неконтагиозных грибковых заболеваний кожи и внутренних органов, вызываемых дрожжевыми и дрожжеподобными грибами, размножающимися почкованием. Различают североамериканский, келоидный, европейский и южноамериканский бластомикозы.

Североамериканский бластомикоз (болезнь Гилкриста). Заболевание эндемично для США, Канады, встречается в странах Африки, иногда в Австралии, Индии, Латинской Америке, Европе, в том числе России. Возбудитель – Blastomyces dermatitidis – диморфный гриб, который в тканях развивается в виде дрожжеподобных почкующихся клеток, а в культурах при температуре 20 °C – в мицелиальной и дрожжевой формах. В тканях имеет вид округлых и овальных клеток диаметром 8 – 10 мкм, иногда до 20 мкм, с двойной оболочкой, размножается почкованием, причем дает единственную почку, располагающуюся на широком основании. В ряде случаев вместо образования почки клетка вытягивается и принимает вид языка колокола. Мицелиальная форма образуется на питательных средах при комнатной температуре. Колонии вначале круглые и гладкие, дрожжеподобные. Позднее они покрываются белым, затем желтовато-буроватым воздушным пушком с короткими шипами. Под микроскопом в таких культурах наряду с круглыми почкующимися дрожжевыми клетками в изобилии встречаются длинные и короткие септированные нити с обильными боковыми конидиями круглой, овальной, иногда грушевидной формы диаметром 3 – 5 мкм. В старых культурах встречаются обильные хламидоспоры диаметром 7 – 18 мкм. Мицелиальная форма легко превращается в дрожжеподобную при выращивании при температуре 37 °C, а дрожжевая при 20 °C – в мицелиальную. На кислых средах вырастает мицелиальная, а на щелочных – дрожжевая форма гриба. Аскомицетная совершенная стадия гриба обозначается Ajellomyces dermatitidis.

Резервуаром возбудителя является почва; заражение происходит при вдыхании спор грибка с пылью. Болеют чаще мужчины; кроме человека, болеют лошади и собаки.

Патогенез и клиника. Первичный очаг локализуется в легких; кожа и внутренние органы вовлекаются в процесс вторично. Обычно заболевание развивается на фоне сниженной резистентности макроорганизма. При генерализации инфекции гематогенным путем характерно образование абсцессов в пораженных тканях в сочетании с картиной хронического воспаления, гигантоклеточной реакцией и некрозом. Различают легочную, диссеминированную и кожную формы заболевания.

Лабораторная диагностика основывается на обнаружении характерных дрожжеподобных двухконтурных клеток с одной почкой в гное, мокроте, биопсийном материале. Обычно легко удается выделить чистую культуру возбудителя при посеве материала на плотные среды; при выращивании при температуре 20 – 25 и 37 °C вырастают характерные колонии, в которых гриб имеет также характерную морфологию. В отдельных случаях можно исследуемый материал вводить внутрибрюшинно белым мышам, а затем исследовать пораженные органы. Довольно эффективны серологические реакции (РСК, агглютинации) и внутрикожные пробы с аллергеном. Специфическая профилактика не разработана. Для специфической терапии используют амфотерицин В в сочетании с хирургическим лечением или электрокоагуляцией очагов при кожной форме заболевания.

Южноамериканский бластомикоз (паракокцидиоидоз) распространен только в странах Южной Америки, и возбудителем его является двухфазный гриб Paracoccidioides brasiliensis. В пораженных тканях человека и животных он имеет сферическую или овальную форму, размеры клеток от 30 до 60 мкм. При почковании образуется одна крупная или несколько мелких дочерних клеток. Характерны крупные круглые клетки с двойной оболочкой, на поверхности которых располагаются мелкие (от 1 до 5 мкм) почки в виде венца или «короны», что является важным дифференциальнодиагностическим признаком для данного возбудителя. Почки овальные или круглые, диаметром от 0,5 до 6 – 10 мкм. Гриб растет на обычных средах с углеводами, кровью, сывороткой. Дрожжевая форма наблюдается при выращивании гриба при 37 °C, колонии гладкие или церебриформные (похожие на головной мозг) и сходны с колониями дрожжеподобных грибов. Под микроскопом видны овальные и круглые клетки крупного размера, с единичными или множественными почками или без них. Они напоминают тканевые формы гриба. Мицелиальная форма возникает при выращивании культуры при комнатной температуре (до 25 °C). Колонии складчатые, в центре покрыты беловато-сероватым, в дальнейшем желтоватым пушком. Под микроскопом видны ветвящийся мицелий и овальные конидии, располагающиеся по бокам мицелиальных клеток; их диаметр 3,0 – 3,5 мкм, иногда конидии группируются кучками.

Возбудитель заболевания обитает на растениях и в почве. Чаще болеют сельские жители. Заражение происходит при травмировании полости рта при чистке зубов веточкой растения или ингаляторным путем. Заболевание от человека человеку не передается.

В пораженных органах обнаруживаются гранулемы с центральной зоной казеозного некроза или нагноением; имеется большое количество гигантских клеток и крупных почкующихся клеток возбудителя. Эти поражения вначале отмечаются на слизистой носа, рта, гортани, реже на коже. Затем в процесс вовлекаются лимфатические узлы, могут образовываться свищи, и происходит генерализация инфекции гематогенным и лимфогенным путем. Возникает поражение внутренних органов.

Лабораторная диагностика. Используются те же методы диагностики, что и при североамериканском бластомикозе. Заражение животных производят внутрь яичка, затем выделяют возбудителя из развивающихся очагов поражения.

Специфическая профилактика не разработана. Для лечения эффективен амфотерицин В, в отдельных случаях благоприятный результат дает длительное лечение сульфаниламидами.

Келоидный бластомикоз (болезнь Лобо). Заболевание встречается в Бразилии, реже в других странах Латинской Америки. Возбудитель – Blastomyces loboi. Гриб двухфазный и по морфологии близок к B. dermatitidis. В патологическом материале представляет собой яйцевидные или овальные клетки диаметром 8 – 16 мкм, имеющие двухконтурную оболочку и 1 – 2 почки. На питательной среде при комнатной температуре культуры гриба растут медленно в виде дисков белого цвета, которые покрыты бархатистым пушком воздушного мицелия. При температуре 37 °C вырастают сероватые дрожжевидные колонии.

Эпидемиология заболевания не изучена. Внедрению возбудителя способствуют травмы кожи, укусы насекомых. Поражается только кожа, где развивается хроническое воспаление, характеризующееся большим количеством гигантских клеток и гистиоцитов. Поражается кожа голеней, стоп, предплечий, ушных раковин, ягодиц, где появляются бугристые, подобные рубцам или опухолям, узлы и бородавчатые разрастания розово-коричневой окраски с лоснящейся поверхностью. При их слиянии образуются инфильтраты. Обычно наблюдается хроническое доброкачественное течение.